Materiali e Metodi

Metodo Elisa

Nel quadro delle nostre nuove politiche di qualità nonchè di soddisfazione continua dei nostri clienti, l’Allergoline Biotech & Research, ha deciso avviare la commercializzazione di un nuovo kit diagnostico per la determinazione delle intolleranze alimentari con metodica ELISA su piastre da 96/182 alimenti. Il test può essere interamente effettuato all’interno dei centri di analisi e si propone di offrire una risposta precisa alle numerose richieste di test affidabili e ripetibili pervenuteci da molteplici realtà sanitarie.
La tecnica immunoenzimatica ELISA forma parte di quelle reazioni sierologiche che utilizzano coniugati per poter visualizzare la reazione ANTIGENE-ANTICORPO. Il test ELISA, si basa sull'utilizzo di anticorpi marcati con un enzima (nel nostro caso la perossidassi), in modo che i coniugati risultanti abbiano una attività sia immunologica sia enzimatica. Essendo uno dei componenti (antigene o allergene di nostra produzione) già adeso alla piastra, la reazione antigene-anticorpo è immobilizzata e pertanto potrà facilmente essere evidenziata con l'addizione del substrato; quest’ultimo, reagendo con l'enzima produrrà una colorazione osservabile a vista nonchè quantificabile. Il sistema di lettura elettronico permette di valutare l’intensità della reazione in grado percentuale.
Con L'ELISA INDIRETTO, diventa quindi possibile procedere alla determinazione degli anticorpi di classe IgG presenti nel siero. L’antigene o allergene, in questo caso, viene direttamente adeso alla base solida ma in questo caso l’anticorpo primario non sarà direttamente marcato, ma un anticorpo secondario marcato, specifico contro quello primario, verrà aggiunto. Questo sistema viene scelto perché particolarmente efficace per la quantificazione da campioni di siero. Ciò permetterà pertanto di evidenziare se nel siero campione del paziente da esaminare esistono o meno anticorpi specifici di classe IgG mediante una reazione colorimetrica catalizzata dalla perossidasi (sulla piastra compaiono pozzetti colorati con un intensita direttamente correlata alla reattività della reazione).
L’intero processo consiste nelle seguenti fasi
Fase I
Trattamento piastre con soluzione di bloccaggio
Fase II
Incubazione della piastra con siero umano da testare
Fase III
Incubazione della piastra con anticorpo ani-IgG umane coniugato a perossidasi
Fase IV
Aggiunta di un substrato per la rilevazione dei complessi antigene alimentare-anticorpo secondario mediante reazione colorimetrica
Fase V
Lettura computerizzata dei risultati

Detta metodica si differenzia dai molteplici test presenti in Italia in quanto:

• E il primo test scientifico con garanzie di ripetibilità poiché utilizza la metodica ELISA.
• Sul mercato rappresenta il miglior rapporto qualità/prezzo rispetto ad altri test.
• La presentazione del referto è chiara e leggibile da chiunque e riporta i risultati delle reazioni immunoenzimatiche in percentuale.
• Il test può interamente essere effettuato all’interno dei singoli centri di analisi.